1 適用範圍（wéi）：

可（kě）用於各（gè）類食品（pǐn）及原料中菌（jun1）落總數的測定。也可用於與食品接觸的容器、操作台和其他設備表麵（miàn）的衛生檢測。

2 方法原理：

將營養培（péi）養基、凝膠和氯化三苯基四氮（dàn）唑（TTC）顯色（sè）劑等加載（zǎi）在試紙片，經加樣、培養後（hòu），細菌菌落在測試片上顯現出紅色菌斑，通過計（jì）數報告結果（guǒ）。

3 操（cāo）作方（fāng）法

（1）樣品處理：無菌稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL無（wú）菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯內，經充分振（zhèn）搖（均質）做（zuò）成1:10的稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅（miè）菌生理鹽水的試管內，用1mL滅菌吸管反複吸吹製成1:100的（de）稀釋液。以（yǐ）此類推，做出（chū）1:1000等稀釋度的稀釋液，每個稀釋（shì）度（dù）更換一支滅（miè）菌（jun1）吸管。

（2）接種：一般食品選2～3個稀釋度（dù）進行檢測，含菌量少（shǎo）的液體樣（yàng）品（如（rú）食用純水和礦泉水等）可直接用原液檢（jiǎn）測。將測試片放在水平台麵上，揭開（kāi）上麵的透明薄膜，用滅菌吸（xī）管吸取樣品原液或稀釋液1mL，均勻（yún）加到中央的紙片上，輕輕將上蓋膜放下，靜置5 min使培養基凝固，非常後用手輕輕地壓一下。每個稀釋度接種兩（liǎng）片。

（3）培養：將測試片疊在一（yī）起放回原自封袋中，透明（míng）麵朝上水平置於（yú）恒溫培養箱內，堆疊片數不超過12片（piàn）。培養溫度為36℃±1℃，培養15～24h。

4 結果判斷與計數：

（1）細菌在（zài）紙片上生長後會顯（xiǎn）示紅色斑點，選擇菌落數適中（10個～100個）的紙片進行計數，乘以稀釋倍數後即為每克（或（huò）毫升）樣品中所含的細（xì）菌菌（jun1）落總數。菌落數（shù）在100以內時（shí），按實（shí）有數報告。大於（yú）100時，用二位（wèi）有效數字，二位有效數字後（hòu）麵（miàn）的數字，以四舍（shě）五入方法計算，並以10的指數來表示。

（2）計（jì）數原則與報告（gào）方式

   ①通常選擇（zé）菌落在10個～100個之間的紙片進行計數，乘以稀釋倍數報（bào）告之（見下表中例次1）。國家標準菌落總數報（bào）告方式術語（yǔ）為cfu/g或mL，cfu的含（hán）義為菌落形（xíng）成單位（wèi）。

   ②若有兩個稀釋度的菌落數在10個～100個（gè）之內，兩者（zhě）的比值小於2，則取其平均數，若大於2，則采用稀釋度小者報告（見下表中例次2和例次3）。

③若三個稀釋度的菌落數都有在10個～100個之內時，應（yīng）選（xuǎn）擇二個低數值的平均數（見下表中例次4）

④若三個稀釋度（dù）的菌落數（shù）均小於10個（gè）或大於100個時，應重新試用更低或更高的稀（xī）釋度進行菌落計數；或采用均小（xiǎo）於數量標準的非常小值，或采用均大於數量標準的非常大值（見下表中例次5和例次6）。

5 表麵取樣（yàng）方法：

加1mL滅菌生理鹽水在（zài）測試片上，靜置至少1h使培養基凝固；提起上層膜，使中央濾紙部分貼到待測物表麵，用手在（zài）外（wài）側輕壓；然後將上蓋（gài）膜（mó）合上，置培養箱內培養。

6 注意事項：

使用過的紙片上（shàng）帶有活菌（jun1），需（xū）及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理（lǐ）。

菌落數少時的情況菌落數多（duō）時的情（qíng）況